详细信息HE染色,即是苏木精-伊红染色法,是形态学最常用的染色方法,在质量较佳的HE染色切片上,各种组织或细胞的一般形态结特点都可以观察到。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
![]() [操作流程] 1.将石蜡切片置于烘箱中60℃烤1~2h; 2.石蜡切片常规二甲苯,乙醇脱蜡至水, 3.苏木素染10分钟, 4.流水冲洗,去余色, 5.0.7%盐酸乙醇分化数秒钟, 6.流水冲洗,切片变蓝约15分钟, 7.95%乙醇30秒钟, 8.酒精性伊红染30秒, 9.I 95%乙醇30秒钟, 10.II 95%乙醇30秒钟, 11.I 100%乙醇30秒钟, 12.II100%乙醇30秒钟, 13.石碳酸二甲苯30秒钟,(1: 4石碳酸1-二甲苯4) 14.I二甲苯30秒钟, 15.II二甲苯30秒钟, 16.中性树胶封片。 [实验结果]: 镜下观察细胞核呈蓝色;细胞浆一般呈红色;胶原纤维呈不同程度的红色,红细胞呈亮红色;粘蛋白呈浅蓝色;钙化组织呈深蓝色等。 [实验中可能出现的问题及解决方案]: 1.细胞核染色苍白,暗淡 原因:此类问题可能有3个影响因素,切片在苏木精染色液停留时间太短;苏木精染色液过度氧化,失去染色能力,不能再继续使用;分化步骤处理时间过长。 对策:切片重新染色。适当延长苏木素染色的时间;更换苏木素染液;缩短分化时间。可以通过镜下观察来摸索染色和分化时间。 2.细胞核过染,即细胞核的蓝色太深,与周围细胞核连成一片,轮廓不清晰 原因:此类问题可能有3个影响因素,即切片在苏木精染色液停留过长、切片太厚、分化步骤时间太短。 对策:对切片进行脱色、漂白、重新染色,结合镜下观察对染色和分化时间做些适当的调整。如果确定是由于切片太厚导致的细胞核过染,则需要重新切片。 3. 伊红着色淡 原因:可能是伊红溶液旧,失去了染色能力;或经伊红染色后在乙醇脱水时间过长。 对策:对切片进行脱色、漂白、重新染色,结合镜下观察对染色和分化时间做些适当的调整。如果确定是由于切片太厚导致的细胞核过染,则需要重新切片。 |
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